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非血紅素鐵檢測試劑盒(紅菲咯啉比色法)使用注意事項:
產(chǎn)品名稱:非血紅素鐵檢測試劑盒(紅菲咯啉比色法)
規(guī)格:50T
儲存:4℃避光
有效期:6個月
產(chǎn)品簡介:
鐵是人體必需的微量元素之一,也是人體中含量最多的微量元素。鐵離子通常以三價鐵形式與轉鐵蛋白結合,通過轉鐵蛋白通道進入細胞,被金屬還原酶STEAP3還原成二價鐵后,參與后續(xù)多種生理和生化過程。機體內(nèi)鐵元素的缺乏會引發(fā)各種缺鐵性疾病,如貧血、免疫力低下等,此外還會導致消化不良、記憶力低下等消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)疾病。然而,盡管鐵元素對于機體如此重要,卻也不是越多越好的。
進入細胞的鐵被還原成亞鐵離子后,會優(yōu)先形成各種鐵結合復合物,參與到各項生理和生化反應中去。當這些復合物含量接近飽和時,多余的二價鐵會在細胞中積累,形成不穩(wěn)定鐵池。鐵池中游離的二價鐵參與芬頓反應,生成以羥基自由基為代表的活性氧(ROS)物質,積累的ROS將膜脂過氧化,從而造成細胞功能喪失和細胞死亡。這是細胞鐵死亡的經(jīng)典調控途徑之一。
動物組織或細胞提取物中非血紅素鐵含量的多少,反應出細胞或組織貯存鐵含量的變化。非血紅素鐵含量的測定可避免總鐵含量測定中樣品內(nèi)血紅素鐵的影響。
非血紅素鐵檢測試劑盒與總鐵測定方法相似,但樣品須經(jīng)酸和熱處理,經(jīng)離心后非血紅素鐵釋放到上清液中,而含血紅素鐵的蛋白則留在沉淀中。其測定原理是動物組織或細胞經(jīng)組織消化液在酸性加熱條件處理后,經(jīng)離心可分離出血紅素鐵和非血紅素鐵,非血紅素鐵再被還原劑還原為二價鐵后與紅菲咯啉生成紅色化合物,在500~550nm有強吸收,可通過酶標儀或分光光度計測定。該試劑僅用于科研領域,不適用于臨床診斷或其他用途。
注意事項:
1、操作中的手術器械、槍頭、容器、96 孔板等,一定保證干燥且干凈,避免鐵污染。
2、組織非血紅素鐵差異較小,一定每個組織和管子都稱重,國產(chǎn)管子的重量相差很多。
3、試劑盒是否過期驗證:取 10ul 鐵標準儲液(100μg/ml)加入 200ul 鐵顯色工作液,看是否顯色為深紅色,如是,則試劑沒過期,可繼續(xù)使用。
4、試劑有效性判讀:用空白管 1 作對照調零,如空白管 2 讀數(shù)<0.004 說明沒有污染可以使用,如果空白管 2 讀數(shù)>0.004,說明組織消化液有污染。
5、組織消化液有強酸性和腐蝕性,請小心操作。
6、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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