檢測(cè)沙門氏菌、霉菌和酵母

一、沙門氏菌快速檢驗(yàn)適用范圍：可用于各類食品和原料中沙門氏菌的定性和初篩檢測(cè)。以及突發(fā)事件應(yīng)急檢測(cè)需要。

二、沙門氏菌快速檢驗(yàn) 方法原理：將選擇性培養(yǎng)基中加入專一性的辛酯酶顯色劑，并將其加載在紙片上，通過培養(yǎng)，如果樣品中含有沙門氏菌，即可在紙片上呈紫紅色的菌落。

三、沙門氏菌檢驗(yàn)操作方法：1樣品處理：無菌稱取待測(cè)樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)，經(jīng)充分振搖或置均質(zhì)器中做成1：10的樣品勻液。2接種：將測(cè)試片置于平坦實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，揭開上層膜，用無菌吸管吸取1mL樣品勻液慢慢均勻地滴加到紙片上，然后再將上層膜緩慢蓋下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固，zui后用手輕輕地壓 一下。每個(gè)樣品接種兩片。3培養(yǎng)：將測(cè)試片疊在一起放回原自封袋中，堆疊片數(shù)不超過12片，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃，培養(yǎng)15～24h。4對(duì)測(cè)試片進(jìn)行觀察，呈紫紅色的菌落為沙門氏菌;呈藍(lán)色的菌落為其他大腸菌，葡萄球菌不生長(zhǎng)。

四、檢驗(yàn)方法注意事項(xiàng)：1有關(guān)驗(yàn)證試驗(yàn)表明，測(cè)試片具有較強(qiáng)的敏感性，在1.5×10-8稀釋時(shí)仍可檢出菌落。臨床實(shí)際應(yīng)用結(jié)果顯示陽(yáng)性檢出率高于分離培養(yǎng)法1.84‰，復(fù)查準(zhǔn)確率提高約13.0%。2 本法還可應(yīng)用于從業(yè)人員體檢、中毒樣品和物體表面的檢測(cè)，用取樣棉簽涂抹被測(cè)物體表面，放入裝有3mL滅菌生理鹽水的試管中，搖晃10s，然后取1mL接種到測(cè)試片上。3注意使用過的測(cè)試片上帶有活菌，需及時(shí)按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理 。

一、霉菌和酵母的檢驗(yàn)適用范圍：本品可用于各類食品及飲用水中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)。

二、快速檢驗(yàn)的方法原理：將霉菌營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基、吸水凝膠和酶顯色劑加載在紙片上，通過培養(yǎng)，在酶顯色劑的放大作用下，使霉菌和酵母菌在紙片上顯現(xiàn)出出來，通過計(jì)數(shù)報(bào)告結(jié)果。與傳統(tǒng)方法相比，省去了配制培養(yǎng)基、消毒和培養(yǎng)器皿的清洗處理等大量輔助性工作，即開即用，操作簡(jiǎn)便。培養(yǎng)時(shí)間由一周縮短為48h～72h。

三、快速檢驗(yàn)的操作方法：1樣品處理：無菌稱取樣品25g(或25mL)放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)，經(jīng)充分振搖做成1:10的稀釋液，用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL，注入含有9mL滅菌水的試管內(nèi)，用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹50次做成1:100的稀釋液，以此類推，每個(gè)稀釋度更換一支滅菌吸管。2接種:1)一般食品選2～3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品(如食用純水和礦泉水等)可直接用原液檢測(cè)。將檢驗(yàn)紙片水平放臺(tái)面上，揭開上面的透明薄膜，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL，均勻加到中央的濾紙片上，然后輕輕將上蓋膜放下，靜置5min，每個(gè)稀釋度接種兩片。2)用手指先沿方格區(qū)邊緣刮一下，防止水外流，然后再在中間輕輕推刮，使水分在紙片方格區(qū)內(nèi)均勻分布，并將氣泡趕走。3培養(yǎng)：將加了樣的檢驗(yàn)紙片每12片疊放在一起，放入自封袋中，平放在28℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h開始觀察計(jì)數(shù)。4結(jié)果判斷與計(jì)數(shù)：霉菌和酵母菌在紙片上生長(zhǎng)后會(huì)顯示藍(lán)色斑點(diǎn)，霉菌菌落顯示的斑點(diǎn)略大或有點(diǎn)擴(kuò)散，酵母菌落則較小而圓滑，許多霉菌在培養(yǎng)后期全呈現(xiàn)其本身*的顏色。選擇菌落數(shù)適中(10～50個(gè))的紙片進(jìn)行計(jì)數(shù)，乘以稀釋倍數(shù)后即為每克(或毫升)樣品中霉菌和酵母菌的數(shù)目。