組織總磷含量檢測(cè)試劑盒

標(biāo)題：組織總磷含量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

組織總磷含量檢測(cè)試劑盒

測(cè)定原理：

總磷經(jīng)消化后，轉(zhuǎn)化成無(wú)機(jī)磷。鉬藍(lán)法是測(cè)定無(wú)機(jī)磷含量的經(jīng)典方法，一定條件下，鉬藍(lán)與磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物質(zhì)，通過(guò)測(cè)定660nm光吸收，即可計(jì)算無(wú)機(jī)磷含     量，進(jìn)而可計(jì)算出組織中總磷含量。

自備儀器和用品：

離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、蒸餾水和濃硫酸。

試劑組成和配置：

試劑一：液體×1瓶，4℃保存（強(qiáng)腐蝕性，強(qiáng)氧化性）。

試劑二：液體×1瓶，4℃保存。

試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前配制，加入7.5mL蒸餾水，溶解后再加入5mL試劑二，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)品：液體×1支，20μmol/L無(wú)機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)液，－20℃保存。

有機(jī)磷消化：

取帶蓋試管，加入精確稱取的約0.1g組織，加濃硫酸1 mL，蓋緊（防止水分散失）后沸水浴10min左右，待溶液呈黑色或棕色時(shí)取出。稍冷后，加試劑一200μL，充分混勻，蓋緊后繼續(xù)沸水浴，直到溶液呈透明狀，取出室溫冷卻后，加蒸餾水8.8 mL，充分混勻；室溫，10000rpm，離心10min，取上清液，待測(cè)。

測(cè)定：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到660 nm，蒸餾水調(diào)零。

2.打開(kāi)水浴鍋，調(diào)節(jié)溫度到40℃。

3. 空白管：取0.5mL EP管，依次加入100μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A空白管。

4. 標(biāo)準(zhǔn)管：取0.5mL EP管，依次加入10μL標(biāo)準(zhǔn)液，90μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。

5. 測(cè)定管：取0.5mL EP管，依次加入10μL上清液，90μL蒸餾水，100μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min，室溫冷卻10 min后于660 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。

注意事項(xiàng)：

1、試劑三需臨用前配制，限當(dāng)天使用。

2、測(cè)定前先用1~2個(gè)樣品做預(yù)實(shí)驗(yàn)，如吸光值很高，需用蒸餾水做相應(yīng)稀釋。

組織總磷含量檢測(cè)試劑盒